注：本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。

產品全稱：EMP3 表皮膜蛋白3elisa基本步驟

英文名稱：Epithelial Membrane Protein 3(EMP3)ELISA Kit

貨號：GOY-01E12593

規格：48T/96T

服務：可提供免費代測服務，以及產品說明書和技術指導等

保存環境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標板,試劑,標準品等。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..需要而未提供。

具有如下優點：

一、高效、靈敏、特異的抗體；

　　二、穩定的重復性和可靠性；

　　三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

　　四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型；

　　五、性價比非常好，節省實驗經費。

試劑和樣本的控制方法：

試劑配制：

1、酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。

2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3、樣品（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4、標記抗體（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5、辣根過氧化物酶標記親和素 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6、標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水25倍。

10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

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EMP3 表皮膜蛋白3elisa基本步驟Mouse Anti-rat IgG/PE-CY5  PE-CY5標記的小鼠抗大鼠IgG 規格: 0.1ml

SIGLEC9  唾液酸結合免疫球蛋白樣凝集素9抗體 規格: 0.2ml

Telomerase Binding Protein, P23  端粒結合蛋白P23抗體 規格: 0.1ml

C10orf81  10號染色體開放閱讀框81抗體 規格: 0.2ml

WDR23  WDR23蛋白抗體 規格: 0.2ml

APAF1(NT)  凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端） 規格: 0.1ml

CSNK1D  酪蛋白激δ1抗體 規格: 0.2ml

GnRHR  促性激素釋放激素受體抗體 規格: 0.1ml

LRRC41  LRRC41蛋白抗體 規格: 0.2ml

phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr187)  磷酸化P27抗體/周期素依賴激抑制劑抗體 規格: 0.1ml

操作步驟：

1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。

2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液。

3、加標準品和待測樣本：取足夠數量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本40μL(即樣本5倍)；空白對照孔不加。

4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。

6、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。

7、溫育：重復4的操作。

8、洗板：重復5的操作。

9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。

10、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。

11、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。

12、計算：根據標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以倍數。