細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

HMEC-1細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持HMEC-1細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含HMEC-1細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于HMEC-1細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MCDB131 培養(yǎng)基                                        445 mL

特級胎牛血清                                               50 mL

HEGF                  

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠幽門螺桿菌抗體IgG(HP-IgG)pcr檢測試劑盒

Human granzyme B (Gzms-B) ELISA Kit 人顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒

HumanCarbohydrateaigen19-9,CA19-9ELISAKit 人糖鏈抗原19-9(CA19-9)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitfor6-K-PG(Mouse6-keto-prostaglandin)ELISAKit小鼠6同前列腺素

引物設計合成和酶切位點分析1個基因

Mousemelanocyteaibody,MCAbELISAKit小鼠黑色素細胞抗體(MCAb)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠凋亡相關因子(FAS)試劑盒 ，英文名： FAS ELISA Kit

Porcine myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 豬髓過氧化物酶(MPO)試劑盒

玉米特定基因序列(IVR)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforLTA(Humanlipoteichoicacids)ELISAKit人脂0壁酸

鐵成分比色法定量試劑盒20次

ELISAKitIgA雞免疫球蛋白A

血管內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D)   作用：   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

血管內(nèi)皮生長因子 165(VEGF165)   作用：   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

血管內(nèi)皮生長因子受體 1(VEGF-R1)   作用：   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

血管內(nèi)皮生長因子受體 2(VEGF-R2)   作用：   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

丙酮酸脫氫酶復合物X蛋白抗體

Rubicon蛋白抗體

HA重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

rhEGF(rh-Epidermal growth factor 100ugrhEGF(rh-Epidermal growth factor)

CTHRC1重組人 CTHRC1 蛋白 Protein

CCL3 Protein Human 重組人 CCL3 / Mip1a 蛋白

HSPB1 Protein Human 重組人 HSP27 / HSPB1 蛋?

HMEC-1 細胞專用培養(yǎng)基rhEGF(rh-Epidermal growth factor 100ugrhEGF(rh-Epidermal growth factor)

CCL3 Protein Human 重組人 CCL3 / Mip1a 蛋白

HA重組甲型流感 H4N6 (A/Swine/Ontario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

HSPB1 Protein Human 重組人 HSP27 / HSPB1 蛋白

CTHRC1重組人 CTHRC1 蛋白 Protein