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PRODUCTS CENTER

產(chǎn)品中心

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞原代細胞小鼠真皮成纖維細胞
小鼠真皮成纖維細胞

產(chǎn)品簡介

小鼠真皮成纖維細胞的相關(guān)*:細胞C-TAK激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
組織C-TAK激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
細胞CaM KII激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
組織CaM KII激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
細胞CaM KIV激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
組織CaM KIV激活性定量檢測試劑盒(A/B/C)

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時間:2025-02-20
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:506
詳細介紹在線留言
品牌其他品牌貨號GOY-01X0981
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性:  

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠真皮成纖維細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0981

商品介紹:

名稱    小鼠真皮成纖維細胞  

2.組織來源:皮膚組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

小鼠真皮成纖維細胞分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠真皮成纖維細胞采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的小鼠真皮成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-M086

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳3-5

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠 CTSQ2 基因全長ORF克隆

大鼠 PRAF2 基因全長ORF克隆

大鼠 TPBPA 基因全長ORF克隆

大鼠 AMDHD1 基因全長ORF克隆

大鼠 SEPP1 基因全長ORF克隆

大鼠 TMEM223 基因全長ORF克隆

大鼠 HBA1 基因全長ORF克隆

大鼠 RAN 基因全長ORF克隆

大鼠 MGAT4A 基因全長ORF克隆

大鼠 CAV1 基因全長ORF克隆

小鼠真皮成纖維細胞0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Defensin-5

93.75-6000 pg/mL ELISA Kit for Human Neutrophil collagenase

225ml10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯均質(zhì)袋 英文名稱:10% NaCl Trypticase Soy Broth 產(chǎn)品規(guī)格:10個/包

15.6-1000 pg/mL 人α突觸核蛋白(Alpha-synuclein)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人沉默調(diào)節(jié)蛋白5(SIRT5)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-17F

78-5000 pg/mL 人白介素5受體αELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL 人核因子E2相關(guān)因子1(NF-E2-related factor 1)ELISA試劑盒

改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬古(mLST-Vm) 英文名稱:Modified lauryl sulfate tryptose vancomycin medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

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