細(xì)胞實驗步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

F81細(xì)胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持F81細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含F81 細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于F81細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-     1640（含NaHCO3 1.5g / L）培養(yǎng)基                       445 mL

特級胎牛血清                                                                        運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA pcr檢測試劑盒

Human melatonin sulfate (MS) ELISA Kit 人褪黑色素(MS)試劑盒

HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)pcr檢測試劑盒分裝

Chickeni-iodothyronine,T3試劑盒雞三甲狀腺原(T3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞TNFALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEsiol,E3ELISAKit小鼠雌三醇(E3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬肌球蛋白輕鏈0酸酶(MLCP)ELISA 試劑盒

Neuroophic factor glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒

Porcineacetylcholine,ACHELISAKit 豬乙酰(ACh)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforAlphaNAG(MouseAlphaN-acetylglucosaminidase)ELISAKit小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶

血液離子(K)濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次

PlaIndole-3-aceticacid,IAAELISAKit植物吲哚乙酸(IAA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒

小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)試劑盒

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒

小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)試劑盒

血紅蛋白ε抗體

PE-Cy5標(biāo)記小鼠CD90單克隆抗體

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白(小肽轉(zhuǎn)運蛋白)多肽

DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein

CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白

CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白

F81 細(xì)胞專用培養(yǎng)基PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白(小肽轉(zhuǎn)運蛋白)多肽

CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白

DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein