細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

產品介紹

12Z細胞培養基由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持12Z細胞優良的生長狀態。

本產品中已包含12Z細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于12Z細胞的培養。

產品主要成分

DMEM/F12 基礎培養基                            445 mL

特級胎牛血清                                             50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

小鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA pcr檢測試劑盒

Human calf iestinal alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 人牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒

HumanHydroxyproline-RichGlycoprotein,HRGPELISAKit 人羥脯糖蛋白(HRGP)pcr檢測試劑盒分裝

Human26Sproteasome,26SPSM試劑盒人26S蛋白酶體(26SPSM)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母纖維素酶(cellulase)活性熒光定量試劑盒20次

Mouseapelin12,AP12ELISAKit小鼠apelin12(AP12)試劑盒規格：96T/48T

大鼠葡萄糖60酸脫氫酶(G6PD)試劑盒 ，英文名： G6PD ELISA Kit

Mouse serum amyloid A (SAA) ELISA Kit 小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒

Ratai-IgEreceptoraibodyELISAKit 大鼠抗IgE受體抗體pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforGP-IIELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶II

細胞低密度脂蛋白(LDL-Cholesterol)酶連續循環比色法定量試劑盒20次

Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAKit大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)試劑盒規格：96T/48T

小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISAKit   ELISA

小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISAKit   ELISA

小鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAKit   ELISA

小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit   ELISA

DNA甲基轉移酶相關蛋白1抗體

干細胞生長因子SCGF抗體

FGFR1重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (Fc 標簽) Protein

Mast Cell Chymase 肥大細胞類1 0.5mgMast Cell Chymase 肥大細胞類1

CALML5重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白

ENPEP Protein Mouse 重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白

12Z 細胞專用培養基Mast Cell Chymase 肥大細胞類1 0.5mgMast Cell Chymase 肥大細胞類1

CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白

FGFR1重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ENPEP Protein Mouse 重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白

CALML5重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標簽) Protein