細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

產品介紹

143B細胞培養基由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持143B細胞優良的生長狀態。

本產品中已包含 143B 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于143B 細胞的培養。

產品主要成分

MEM 基礎培養基                      440 mL

特級胎牛血清                            50 mL

MEM NEAA非必需氨基酸            5 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA pcr檢測試劑盒

Human cytokeratin 20 (CK-20) ELISA Kit 人細胞角蛋白20(CK-20)試劑盒

Humanai-scleroderma70aibody,SCL70/topoⅠELISAKit 人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)pcr檢測試劑盒分裝

HumanCyclin-D2試劑盒人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA規格：96T/48T

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HumanPregnancySpecificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-GELISAKit人特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)試劑盒規格：96T/48T

小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)ELISA 試劑盒

Human urinary protein (UP) ELISA Kit 人尿蛋白(UP)試劑盒

HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit 人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)pcr檢測試劑盒分裝

GuineapigleukoieneD4,LT-D4試劑盒豚鼠白三烯D4(LTD4)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母細胞壁可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseCA724ELISAKit小鼠腫瘤標志物(CA724)試劑盒規格：96T/48T

人周期素依賴性激酶5(CDK-5)試劑盒

人周期素依賴性激酶4(CDK-4)試劑盒

人周期素依賴性激酶2(CDK-2)試劑盒

人重組激活基因2(RAG-2)試劑盒

腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體

β淀粉樣肽（1-40）抗體

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GABA/KLH γ1氨基偶聯血藍蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶聯血藍蛋白

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白

143B 細胞專用培養基GABA/KLH γ1氨基偶聯血藍蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶聯血藍蛋白

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽) Protein

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein