細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

大鼠原代小腸隱窩上皮細胞培養基由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持大鼠原代小腸隱窩上皮細胞優良的生長狀態。

本產品中已包含大鼠原代小腸隱窩上皮細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代小腸隱窩上皮細胞的培養。

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

公司正在出售的產品：

E.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein 0.5mgE.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein) DH 5 alpha 大腸桿菌菌體蛋白

CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白 (Fc 標簽)

MPL重組大鼠 c-MPL / CD110 / TPOR 蛋白 Protein

IFNAR1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNAR1 / IFNAR 蛋白

LTF重組人 Lactotransferrin / LTF 蛋白 Protein

大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)試劑盒 ，英文名： LDL-IC ELISA Kit

Pig hea muscle oponin I (cTn- I) ELISA Kit 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒

鉤端核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T

CLIAKitforLR/Ob-R(HumanLeptieceptor)ELISAKIT人苗條素受體

通用封阻緩沖液100毫升

ELISAKitAT-Ⅲ雞抗Ⅲ抗體

小鼠血管內皮細胞生長因子B(mouse VEGF-B)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠血管內皮細胞生長因子C(mouse VEGF-C)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠血管內皮細胞生長因子D(mouse VEGF-D)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠纖維蛋白肽B(FPB)試劑盒 96T/48T

Human leucine aminopepridase (LAP) ELISA Kit 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)試劑盒

Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit 人脂0壁酸(LTA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenfactorB,BF試劑盒雞B因子(BF)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞CASPASE-4蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISAKit小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)試劑盒規格：96T/48T

26S蛋白酶體非ATP酶調節亞基11抗體

Tyrosine Hydroxylase

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LTF重組人 Lactotransferrin / LTF 蛋白 Protein

CD8B Protein Human 重組人 CD8B / P37 / LEU2 蛋白 (Fc 標簽)

IFNAR1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNAR1 / IFNAR 蛋白

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。