細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

牛原代小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持牛原代小腸粘膜上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含牛原代小腸粘膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于牛原代小腸粘膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)試劑盒 ，英文名： MIF ELISA Kit

Human amyloid precursor protein (APP) ELISA Kit 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)試劑盒

MonkeyIerleukin1,IL-1ELISAKit白介素1(IL-1)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

CLIAKitforBGP(Osteocalcin/BoneGla-protein)ELISAKit兔

細(xì)菌氫/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次

RabbitIerleukin9,IL-9ELISAKit兔子白介素9(IL-9)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)試劑盒

Hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒

Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

CLIAKitfor15-LO/LOX(Mouse15-lipoxygenase)ELISAKit小鼠15脂加氧酶

飲料比色法定量試劑盒20次

MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)試劑盒規(guī)格：96T/48T

乳酸（LD）測(cè)試盒（測(cè)全血）   Lactic acid (LD) test case (whole blood)

乳酸（LD）測(cè)試盒（測(cè)血清、組織等）   Lactic acid (LD) test case (serum, tissue, etc.)

乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)試盒   Lactate dehydrogenase (LDH) test kit

蘋果酸脫氫酶測(cè)試盒（測(cè)血清）   Apple acid dehydrogenase test case (Ce Xueqing)

乙酰化組蛋白H2A抗體

RASAL3蛋白抗體

CDNF重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白 Protein

ADM R, Adrenomedullin receptor 腎上腺髓質(zhì)素受體(抗原 0.5mgADM R, Adrenomedullin receptor 腎上腺髓質(zhì)素受體(抗原)

CDK2AP2重組人 CDK2AP2 蛋白 Protein

IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽)

F11R Protein Rat 重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋

牛原代小腸黏膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基ADM R, Adrenomedullin receptor 腎上腺髓質(zhì)素受體(抗原 0.5mgADM R, Adrenomedullin receptor 腎上腺髓質(zhì)素受體(抗原)

IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽)

CDNF重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白 Protein

F11R Protein Rat 重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CDK2AP2重組人 CDK2AP2 蛋白 Protein