細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基，是在MEM培養基的基礎上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量，同時又分為高糖型（4500mg/L）和低糖型(1000mg/L)。

DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的縮寫，所以其特點主要包括以下：

（1）氨基酸含量為依格爾培養基的2倍，

（2）維生素含量為依格爾培養基的4倍；

（4）含有微量的鐵離子。

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human sialic acid (SA) ELISA Kit 人唾液酸(SA)試劑盒

HumaniactParathormone,i-PTHELISAKit 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancardiacankyriepeatdomain1,ANKRD1試劑盒人心肌錨蛋白重復域1(ANKRD1)試劑盒規格：96T/48T

重組腺病毒載體轉染試劑盒10次

HumanSolubleClusterofdiffereiation38,sCD38ELISAKit人可溶性CD38(sCD38)試劑盒規格：96T/48T

大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)試劑盒 ，英文名： IGFBP3 ELISA Kit

Mouse visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 小鼠內臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒

MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKIT 小鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit人cAMP反應元件結合蛋白

細胞AX1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitALP-B大鼠骨特異性堿性0酸酶B

小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

鈉通道蛋白11α抗體

中性酯水解酶1抗體

PECAM1重組小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白 (His 標簽) Protein

BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源神經營養因子(腦衍化神經營養因子)(多肽片斷抗原)

IGF1重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白 Protein

GADD45A Protein Human 重組人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 標簽)

TN屬

DMEM 低糖培養基ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide 0.5mgATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) ATP酶通道蛋白抗原

FGFR4 Protein Human 重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白

CNTNAP2重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白 Protein

IL25 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標簽)

ENPP2重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 Protein