細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

產品介紹

Minimum Essential Medium（MEM）

也稱必需培養基，它僅含有12種必需氨基酸、和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養。MEM-Alpha一般用于培養一些難培養細胞類型，而其它沒有特殊之處的細胞株則幾乎均可采用MEM來培養。

培養基主要成份表

（+）  1000mg/L D-葡萄糖

（+）  2200mg/L NaHco3

（+）  Earle’s 平衡鹽

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

小鼠(CH)試劑盒 96T/48T

Human placeal lactogen (PL) ELISA Kit 人胎盤泌乳素(PL)試劑盒

Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 人抗復合物(TAT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanazurocidin,AZU試劑盒人天青殺素(AZU)試劑盒規格：96T/48T

植物源性飼料大豆試劑盒20次

Humahrombin，TMELISAKit人(TM)試劑盒規格：96T/48T

大鼠乙醇脫氫酶1(ADH1)試劑盒 ，英文名： ADH1 ELISA Kit

Mouse terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒

MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAkit 小鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumandecay-acceleratingfactor,DAFELISAKit人降解加速因子

細胞Akt3/PKBγ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

PPAR-γ大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ

脫氧膽酸   10g

DeoxycholicAcid,SodiumSalt   50g

焦碳酸二乙脂   10ml

DEPC   100ml

磷脂酸磷酸酶LPIN2抗體

早期發育調控蛋白1/EDR1抗體

TSPAN7重組食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL-23R(Interleukin-23 receptor 0.5mgIL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原

PKM重組人 PKM2 / OIP3 蛋白 Protein

DPEP2 Protein Human 重組人 DPEP2 / MBD-2 蛋白

CD59A Protein Mouse 重組小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 蛋白 (F屬

MEM（無酚紅 ） 培養基PAR-2 (Protease-activated receptors-2 0.5mgPAR-2 (Protease-activated receptors-2) 蛋白酶激活受體-2抗原

CCL20 Protein Human 重組人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白

HA重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

AZU1 Protein Human 重組人 AZU1 / Azurocidin 1 / CAP37 蛋白

SUV420H2重組人 SUV420H2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein